二代測(cè)序(NGS)的建庫流程是很長很復(fù)雜的，建庫的每一步都建立在前一步的基礎(chǔ)上，因而質(zhì)量控制（QC）顯得尤為重要。無論您的初始樣本類型是什么，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程中，確保靶標(biāo)的完整性、大小和集中程度是構(gòu)建高質(zhì)量文庫，進(jìn)而獲得準(zhǔn)確、可重復(fù)的結(jié)果的關(guān)鍵。為了幫助您更好地確定實(shí)驗(yàn)流程，安捷倫匯總了各類初始樣本的各種建庫流程。

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測(cè)序過程中的關(guān)鍵 QC 步驟

• Fragmentation

片段化是將樣本剪切成更小的片段的過程。可以通過酶切或超聲的方法來實(shí)現(xiàn)。QC 是這里的一個(gè)重要步驟，以確保片段化的條件是合適的。

• Ligate adaptors

接頭是已知的寡核苷酸序列，用于連接到未知的目標(biāo)測(cè)序片段，提供測(cè)序引物結(jié)合區(qū)和樣本識(shí)別碼。接頭連接后的 QC 可以確保接頭成功連接到 DNA。

• Size selection

片段篩選的目的是去掉多余的引物和接頭序列，獲得需要的目標(biāo)序列。QC 在這一步是至關(guān)重要的，可以確保后留下的是目標(biāo)大小和足夠濃度的文庫。

• Normalize/pool

在文庫制備結(jié)束時(shí)，必須對(duì)樣本進(jìn)行量化，以確定要加載到測(cè)序儀上的文庫量。如果需要多個(gè)文庫混合上機(jī)測(cè)序，QC 可以幫助提供稀釋指導(dǎo)，確保加載到測(cè)序儀上的文庫是均勻的，有利于提高數(shù)據(jù)的均一性。

 重慶華雅思創(chuàng)生物醫(yī)藥科技有限公司是一個(gè)以提供高新生物和醫(yī)藥技術(shù)為核心的生物醫(yī)藥技術(shù)服務(wù)，技術(shù)咨詢和產(chǎn)品銷售的品牌企業(yè)。公司于2019年3月經(jīng)國家相關(guān)政府部門審批正式成立，成立以來，公司運(yùn)用現(xiàn)代電子商務(wù)模式一直致力于幫助客戶達(dá)成科學(xué)研究。公司立足西南，以“積極借鑒成功經(jīng)驗(yàn)，追求創(chuàng)新”為核心思想，時(shí)刻牢記初心，始終秉承“誠信、思考、研究”的哲學(xué)觀，在為廣大客戶服務(wù)的過程中不斷完善公司的業(yè)務(wù)結(jié)構(gòu)和能力，華雅思創(chuàng)生物醫(yī)藥作為生命科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的一份子，我們鄭重向客戶承諾：為客戶精心挑選優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品，提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，為生物高新行業(yè)的發(fā)展奮斗。在此，華雅思創(chuàng)生物熱誠歡迎您的關(guān)懷、指導(dǎo)和幫助，并期盼與您真誠合作，共贏發(fā)展！

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